1、手术操作人员按常规手术要求更衣、消毒。在整个操作过程中，除注意无菌操作外，须特别注意无毒操作。除了穿刺针和卵泡收集管，应避免任何其他东西直接或间接接触卵沲液，无菌手套上的滑石粉应彻底冲洗干净。
2、由于卵子对光线及温度敏感，因此消毒后将灯光关闭、术前用恒温试管架预热。
3、取卵室和实验室应在一起或相连，取出的卵泡液马上传递给实验室人员进行卵子的收集。
4、穿刺针穿刺路径应避开大血管、膀胱、子宫内膜和肠管。穿刺时必须小心谨慎，认清卵巢的界限。特别要注意不能误将髂内静脉或肠管当作卵泡，造成误穿。仔细观察肠管有蠕动，而髂内静脉在转动探头时会显示长管状，可以准确鉴别。
5、巧克力囊肿可随卵泡的发育而长大，被误认为卵泡。如在取卵过程中误穿巧克力囊肿，应立即更换穿刺针及试管。对于明确的巧克力囊肿，应在取囊后予以穿刺。对于输卵管积水，亦应在卵泡穿刺结束后进行穿刺，吸尽积液。
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