三尖瓣狭窄患者易疲乏，且会出现下肢水肿、恶心、呕吐或嗳气等症状，根据三尖瓣区舒张期杂音，结合典型颈静脉a波和右心房增大体征，可初步考虑三尖瓣狭窄的诊断。确诊有赖于超声心动图及心导管检查。
1、心电图检查
心电图可示三尖瓣狭窄如下特点：Ⅱ、Ⅲ、aVF导联P波高尖，常大于0.25mV，提示右心房肥大。如果出现右室肥厚和电轴右偏，表明合并二尖瓣狭窄。
2、X线检查
通过胸部X线检查如果右心房明显扩大，伴上腔静脉增宽，同时右心室无增大，肺动脉不扩张，肺血减少，可基本判断为单纯三尖瓣狭窄。
3、颈静脉搏动图检查
颈静脉搏动图有巨大a波是三尖瓣狭窄的特异性特征。
4、超声心动图
三尖瓣狭窄确诊必做多普勒超声心动图、M型超声心动图和二维超声心动图。三尖瓣狭窄有以下超声心动图特征。
（1）多普勒超声心动图：在三尖瓣口右心室流入道处取样，可探测到舒张期高速射流频谱，并可测出跨瓣压差，这是确诊三尖瓣狭窄的重要指标，房、室的压力阶差>0.67kPa（5mmHg），彩色多普勒可在二维平面上显示多彩镶嵌的射流束。
（2）M型和二维超声心动图：三尖瓣叶增厚、回声增强、活动僵硬、开放受限，右心房扩大，上、下腔静脉及肝静脉增宽。M型运动曲线EF、斜率减慢，瓣叶呈同向运动。
5、心导管检查
这是实行三尖瓣分离术前必做的检查，也是全面反映三尖瓣病变的必做检查之一。三尖瓣狭窄诊断标准之一是平均舒张期压力阶差≥0.27kPa（2mmHg），心导管检查可同步记录右心房和右心室的压力，在测量跨瓣压力阶差时，应考虑到患者生理情况下呼吸变化，是否存在心房颤动或低心排血量，这些因素都会影响测量结果。
6、心脏造影
右心房造影可见右心室充盈延缓，并可见三尖瓣增厚和活动受限，以及右心房壁增厚和右心房内径扩大。
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